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2016年4月16日 星期六

蝦米,脫鈣就不能做基因分析?要再做一次切片,媽媽咪唷~


一早接到林醫師的電話。

病理科莊醫師嗎?我的病人懷疑大腿骨頭轉移,病理報告打肺癌轉移。聽說骨頭檢體要用強酸去"脫掉鈣質",讓檢體變軟才有辦法做病理玻片,可是文獻上都說強酸脫鈣會讓DNA水解斷裂,常無法做肺癌基因突變分析。請問我需要為了基因檢查再安排病人去做一次肺切片嗎?




在早先的文章中,我分享了相關肺癌診斷的各種切片或者細胞檢查。除了依照現行的診斷準則,肺癌要盡可能區分出"鱗狀上皮細胞癌(Squamous cell carcinoma)"和"腺體癌(Adenocarcinoma)"外,另一個重點就是腺體癌在東方人有較高比率的某些腫瘤基因突變

這些基因突變,對於某些標靶藥物的治療反應很好,能延長病人的存活年限,還能兼顧很重要的生活品質!

有了治療反應良好的鼓舞,建議常規做腫瘤基因突變分析是目前的重點。


基因突變分析,做法很多種。但是,萬變不離本質是DNA品質要保存良好才行。常規檢體分析DNA不是問題,但是骨頭檢體分析DNA很有挑戰!


肺癌不是長在肺臟,要做肺切片。跟骨頭有什麼關係?


沒錯!肺癌,的確是土生土長在肺臟的惡性腫瘤。但是,惡性腫瘤在一個地方佔據久了,會想盡辦法擴展勢力。它們會想辦法跑出去(轉移)

它們想藉由人體的高速公路,經由血管(血液轉移)或者淋巴管(淋巴結轉移),全身亂跑。當然人體有一定的免疫力,能抵擋一陣子。一旦突破免疫力的防守,到外地落地生根,就叫做轉移成功(metastasis)

因此,肺癌跑到骨頭去,叫做肺癌的骨頭轉移。不叫骨頭癌症,因為它是外來客。至於土生土長在骨頭的腫瘤,我們才叫它骨頭癌症

舉個例子,在台灣出生長大,叫台灣人。他也許會跑到美國去工作,是當地的外來客,但我們不會因此叫他美國人,還是台灣人。



為什麼這麼麻煩,就做之前講的肺切片就好了,為什麼做骨頭切片?


原因很多,也因各病人狀況而異。

舉個例子,有些病人初期症狀只發現骨頭疼痛或者骨折,追查下去才發現是癌症在骨頭裡做怪。病理醫師診斷為肺癌的骨頭轉移,才回過頭來發現肺臟裡悶不吭聲地長了一顆腫瘤。

肺癌的骨頭轉移,表示了兩件事情。

第一,肺癌擴散了,目前全身跑,要用全身性的方法治療,如標靶藥物或者化學藥物,經由血液跑往全身去追殺癌症細胞。

第二,原發生長地的肺臟,再做局部切除腫瘤,並無法治癒癌症。因此,通常不會再去切除肺臟。

所以,肺癌已經擴散時,我們需要做肺癌的基因突變分析,評估是否能用標靶治療,一種全身性的治療。


當我們唯一擁有的腫癌檢體來源是骨頭時,怎麼辦?


第一,放棄!再做一次切片?不然怎麼辦,骨頭總得要脫鈣。不脫鈣,太硬沒有辦法切片。

第二,照舊用骨頭檢體去做DNA分析!But how?改良!

脫鈣一定要用強酸嗎?其實不一定,我用EDTA(慢速脫鈣液)搭配超音波震盪器加速反應,福馬林固定一天,脫鈣一整天,成品如下。


HE染色


TTF-1免疫染色


早期我們採用這個方法是想要解決骨體檢體去分析DNA,失敗率很高,病人常要重新再做一次切片。

想到問題,上網搜尋文獻,找方法!

因為文獻上看到有學者研究用慢速脫鈣液來處理骨頭檢體,相較於強酸處理,具有不影響DNA分析和不減少免疫蛋白染色表現的好處。

但是慢速脫鈣液,顧名思義,就是"很慢速",以前要放置三~四天才能軟化一般骨頭碎片。現在利用超音波振盪機能加速反應,減少時間到一天。

我相信慢工出細活,雖然比強酸脫鈣,多了一天處理時間,也晚了一天發病理報告。但是,可以減少重新做肺切片(耗時三至四天),或者減少DNA品質不良,無法分析被退件的時間損失(耗時一週至二週,還是得重做一次切片)。

凡事在一開始,把對的事作好!才是最省時間滴!

我們多用點心,醫師病人們也多點耐心,一起把事情做好。